Matilda: En vacker ung kvinna som är föremål för Ambrosios önskan. Hon dödas så småningom av Ambrosio efter att hon avvisat honom.
Agnes: En ung nunna som är Ambrosios elev. Hon förförs av Ambrosio och blir gravid. Hon dör så småningom av förlossningen.
Don Raymond: Abboten i klostret där Ambrosio bor. Han är en klok och rättvis man som försöker hjälpa Ambrosio att övervinna sina frestelser.
Donna Elvira: En rik och mäktig kvinna som blir Ambrosios älskare. Hon förråder honom så småningom och överlämnar honom till inkvisitionen.
Inkvisitorn: En mäktig och hänsynslös man som presiderar över Ambrosios rättegång och i slutändan dömer honom till döden.