Aloysia Weber föddes i Zell im Wiesental, i Schwarzwald-regionen i Tyskland, den 12 november 1760. Hennes far, Fridolin Weber, var musiker och musiklärare, och hennes mor, Cäcilia Weber, var sångerska. Aloysia visade tidigt talang inom musik, och hon började studera piano och röst med sin far.
År 1777 flyttade Aloysia och hennes familj till München, där hon gjorde sin scendebut vid 17 års ålder. Hon blev snabbt en framgångsrik operasångerska och spelade i ledande roller i operor av Mozart, Gluck och andra kompositörer.
År 1780 träffade Aloysia Wolfgang Amadeus Mozart, som då bodde i München. Mozart blev omedelbart slagen av Aloysia, och han komponerade flera arior åt henne. De två var förlovade för att gifta sig, men förlovningen bröts 1781.
Aloysia fortsatte att uppträda framgångsrikt som operasångerska fram till 1790, då hon drog sig tillbaka från scenen. Hon gifte sig med Joseph Lange, en hovmusiker, 1795. Paret fick två barn, en son och en dotter.
Efter sin pensionering ägnade Aloysia Weber sig åt musikundervisning. Hon lärde ut piano och röst för elever i alla åldrar, och hon var en respekterad musiklärare i Wien under många år. Hon dog i Wien 1839.