Lady Macbeth: Macbeths fru och medkonspiratör. Hon är en hänsynslös och ambitiös kvinna som får Macbeth att döda kung Duncan. Efter mordet blir Lady Macbeth plågad av skuld och ånger, och hon dör så småningom i ett tillstånd av galenskap.
Kung Duncan: The King of Scotland i början av pjäsen. Han är en snäll och välvillig härskare, och hans mord av Macbeth sätter igång historiens tragiska händelser.
Banquo: En medgeneral och nära vän till Macbeth. Han misstänker Macbeths inblandning i kung Duncans mord, och han blir så småningom ett offer för Macbeths paranoia.
De tre häxorna: Tre övernaturliga figurer som profeterar att Macbeth kommer att bli kung. Deras profetior sätter igång pjäsens händelser, och de används som en symbol för ödet och konsekvenserna av ambition.
Macduff: En skotsk adelsman som motsätter sig Macbeths styre och så småningom leder de krafter som störtar honom.
Malcolm och Donalbain: Kung Duncans söner. Malcolm flyr till England efter sin fars mord och återvänder så småningom till Skottland för att leda en armé mot Macbeth. Donalbain flyr också från Skottland efter mordet men spelar ingen nämnvärd roll i resten av pjäsen.
Hecate: Trolldomens och magins gudinna. Hon dyker upp i akt III i pjäsen och befaller häxorna att göra hennes bud.